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BL21(DE3) Chemically Competent 感受態(tài)

簡要描述:BL21(DE3) Chemically Competent 感受態(tài) 保存條件:-80℃ 基因型 F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)

  • 產(chǎn)品型號:ABG201-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-25
  • 訪  問  量:200

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG201-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細胞應用領域環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

基因型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3)


簡要說明

BL21(DE3)感受態(tài)細胞用于高效表達克隆于含有噬菌體T7啟動子的表達載體(如pET系列)的基因。λ噬菌體DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶,該區(qū)整合于BL21的染色體上,所以稱為BL21(DE3)。可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等質粒的蛋白表達。BL21(DE3)感受態(tài)細胞由特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質粒檢測轉化效率達108cfu/μg。


操作說明

  1. 取100μl冰上融化的 BL21(DE3)感受態(tài)細胞,加入目的質粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

  2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

  3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。


注意事項

  1. 感受態(tài)細胞最好在冰上融化。

2.混入質粒時應輕柔操作。

3.轉化高濃度的質??上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。

4.誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。

5.為獲得需要量的蛋白,最佳誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。




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