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BL21 Chemically Competent Cell感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述:BL21 Chemically Competent Cell感受態(tài)細(xì)胞 保存條件:-80℃ 基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS) BL21 Chemically Competent Cell感受態(tài)細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:ABG200-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-25
  • 訪  問  量:217

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號ABG200-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

基因型E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal[malB+]K-12(λS)

簡要說明BL21是最早開發(fā)的用于原核表達(dá)的菌株,BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表達(dá)菌株均來源于BL21菌株。該菌株主要用于非毒性蛋白的表達(dá),不含T7RNA聚合酶,所以不能用于由T7啟動子驅(qū)動的蛋白表達(dá)(如:pET系列);但含有大腸桿菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如:pGEX,pMAL質(zhì)粒)。 BL21感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá)107cfu/μg。


 操作說明

 1.取100μl冰上融化的BL21感受態(tài)細(xì)胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。


注意事項

  1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。

  2. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。

  3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。

  4. 誘導(dǎo)時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。

  5. 為獲得需要量的蛋白,最佳誘導(dǎo)時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。


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