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當前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  Abnbio感受態(tài)細胞  >  表達 感受態(tài)細胞  >  ABG206-50BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受態(tài)細胞

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受態(tài)細胞

簡要描述:BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL 感受態(tài)細胞 保存條件:-80℃ 基因型F–ompT hsdS(rB–mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3)endAHte[argU proL CamR] [argU ileY leuW Strep/SpecR]

  • 產(chǎn)品型號:ABG206-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-25
  • 訪  問  量:241

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG206-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細胞應用領(lǐng)域環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

基因型

F–ompT hsdS(rB–mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3)endAHte[argU proL CamR] [argU ileY leuW Strep/SpecR]


簡要說明

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株來源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,從而減少對重組蛋白的降解,補充大腸桿菌缺乏的4種稀有密碼子(AGA,AUA,CCC,CUA)對應的tRNA (argU, ileY, proL, leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū)(DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列、pGEX、pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達,同時具有四環(huán)素,lu霉素,lian霉素,壯guan霉素抗性。BL21- CodonPlus(DE3)-RIPL感受態(tài)細胞由特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達108 cfu/µg DNA。


操作說明

1、取100μl冰上融化的BL21-CodonPlus(DE3)-RIL感受態(tài)細胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。




注意事項

1、感受態(tài)細胞最好在冰上融化。

2.混入質(zhì)粒時應輕柔操作。

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。

4.誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。

5.為獲得需要量的蛋白,最佳誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。






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