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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述:HB101 Chemically Competent Cell Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號(hào):HB101
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-20
  • 訪  問  量:283

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG016-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

HB101 Chemically Competent Cell

基因型:

F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (strR) glnV44λ-

簡要說明:

HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產(chǎn)物(同時(shí)也是Stbl3的原始菌株)。recA13突變可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組,降低錯(cuò)誤重組的概率;但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時(shí)務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失內(nèi)切酶系統(tǒng),增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量;此菌株具有LIAN霉素抗性;不存在lacIqZΔM15,不可用于藍(lán)、白斑篩選。  High5TM系列HB101感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×108cfu/μg。

操作說明:

1.HB101感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。 

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。 

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1.感受態(tài)細(xì)胞處于冰水混合狀態(tài)時(shí)立即插入冰上。 

2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。 

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。 

4.操作過程中勿將感受態(tài)暴露于氧化性環(huán)境中,例如超凈臺(tái)應(yīng)將臭氧排凈后再使用。



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