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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞

簡要描述:TG1 Chemically Competent Cell Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號:TG1
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-20
  • 訪  問  量:258

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG015-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細胞培養(yǎng)應用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

TG1 Chemically Competent Cell

基因型:

F′ traD36 proAB lacIqZΔM15]supE thi-1Δ(lacproAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)

簡要說明:

TG1來源于E. coli K-12菌株,是目前生長速度最快的克隆用大腸桿菌菌株,在平板上37℃,7h可見克隆。主要的噬菌體展示用菌株,同時也可用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍白斑篩選等實驗;但不含核酸酶endA1突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時推薦使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內(nèi)大量的核酸酶。High5TM系列TG1感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。

操作說明:

1.TG1感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。 

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。 

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項:

1. 感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化,融化后8分鐘內(nèi)加入質(zhì)粒,否則會影響轉(zhuǎn)化效率。 

2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應輕柔操作。 

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。

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