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KM71 酵母感受態(tài)細胞

簡要描述:KM71 酵母感受態(tài)細胞 保存條件:-80℃ 酵母促轉化劑 100μl -20℃畢赤酵母轉化液 5 ml 4℃

  • 產(chǎn)品型號:ABG727-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-27
  • 訪  問  量:293

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG727-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細胞應用領域環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

簡要說明

YM4271菌株,MATa型,可直接轉化質?;蚺cMATα型酵母菌株EGY48、Y187等通過mating操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker為:trp1,leu2,ura,報告基因為: HIS3。可用于酵母雙雜,酵母單雜或異源蛋白表達等試驗。YM4271感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作pGADT7質粒檢測轉化效率>104 cfu/μg DNA。


操作說明

1、取需轉化質粒5µg,酶切,回收;

2. 取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預冷的線性質粒1-5µg(體積不高于15 µl),酵母促轉化劑10µl,100µl冰上融化的KM71感受態(tài)細胞,畢赤酵母轉化液500µl,輕輕翻轉混勻6-8次;

3. 30℃水浴30min,每15min輕輕翻轉混勻6-8次;

4. 每支加入20µl的二甲基亞砜;(用于提高轉化效率,也可不做)

5. 42℃水浴15min,每7.5min輕輕翻轉混勻6-8次;

6. 12000rpm瞬時離心棄上清,每支加1ml的YPGPlus(或YPG)于30℃復蘇1h;(用于提高轉化效率,也可不做)

7. 12000rpm瞬時離心棄上清,用100µl 0.9%NaCl重懸,涂板,30℃培養(yǎng)3-7d。


注意事項

1、使用酵母促轉化劑前,請把裝有酵母促轉化劑的管子在沸水中 煮沸5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

2.轉化液低溫環(huán)境下會析出,請于常溫下溶解后使用。

3.轉化全程要無菌操作。













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