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TB1 感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述:TB1 感受態(tài)細(xì)胞 保存條件:-80℃ 基因型F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR

  • 產(chǎn)品型號:ABG217-50
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-27
  • 訪  問  量:232

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號ABG217-50
規(guī)格50X100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

基因型

F– ara Δ(lac-proAB) rpsL (StrR)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15]thi hsdR


簡要說明

TB1感受態(tài)細(xì)胞來源于JM83,是JM83hsdR型,只含有大腸桿菌RNA polymerase,缺少BL21(DE3)菌株的 T7 RNA polymerase,適合NEB公司的pMAL系列質(zhì)粒原核蛋白表達(dá)(The pMAL vectors use the E. coliRNApolymerase),不能用于pET系列質(zhì)粒的表達(dá),具有l(wèi)ian霉素抗性。TB1感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達(dá)108cfu/μg。


操作說明

1、取100μl冰上融化的TB1感受態(tài)細(xì)胞,加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌2YT或LB培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。


注意事項

1、感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。

2. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。

4. 誘導(dǎo)時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。

5. 為獲得需要量的蛋白,最佳誘導(dǎo)時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。











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