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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述:S17-1 λpir Chemically Competent Cell/ Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號(hào):S17-1 λpir
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-21
  • 訪  問  量:432

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG028-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

S17-1 λpir Chemically Competent Cell

基因型:

RP4-2(Km::Tn7,Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1,thiE1, hsdR17, creC510

簡要說明:

S17-1λpir菌株的染色體中整合了RP4-2質(zhì)粒,該質(zhì)??梢詳y帶染色體的部分DNA在接合菌株之間轉(zhuǎn)移。S17- 1λpir菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;同時(shí)為重組酶缺陷型 (recA1),減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA 的穩(wěn)定性。Tn7賦予該菌株弱的 lian霉素抗性。 S17-1λpir感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×108 cfu/μg DN

操作說明:

1. S17-1λpir感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手bo打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。 

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 

4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。 

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)(12-15 h)。

注意事項(xiàng):

1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 

2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。




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