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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞 DB3.1 Chemically Competent Cell
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號(hào):DB3.1
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-20
  • 訪  問(wèn)  量:282

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG012-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

DB3.1 Chemically Competent Cell

基因型:

F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr) xyl5 Δleu mtl11

簡(jiǎn)要說(shuō)明:

DB3.1大腸桿菌菌株基因組中含有 gyrA462 基因,賦予其對(duì)ccdB毒性基因的抗性,特別適用于構(gòu)建或擴(kuò)繁含有ccdB基因的質(zhì)粒載體(例GATEWAY System vector) ,此菌株具有鏈MRI-素抗性。 High5TM系列DB3.1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。

操作說(shuō)明:

1.DB3.1感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中),加入目的DNA并用指尖輕輕打管底混勻(避免用槍吸打),冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無(wú)菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。 

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 混入目的DNA時(shí)應(yīng)輕柔操作。 

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。



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