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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:XL2-Blue Chemically Competent Cell Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞 保存條件:-80℃
XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株,為Hte(hightransformation efficiency)基因型,Hte是Stratagene開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型。

  • 產(chǎn)品型號(hào):XL2-Blue
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-20
  • 訪  問  量:256

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG010-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

XL2-Blue Chemically Competent Cell

基因型:

TetRΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIqlacZM15Tn10(TetR)AmyCamR}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1

簡(jiǎn)要說明:

XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株,為Hte(hightransformation efficiency)基因型,Hte是Stratagene開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型,已成功應(yīng)用于40kd質(zhì)粒的構(gòu)建。Hte使得XL2-Blue適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化,降低片段大小的偏愛性,多用于文庫構(gòu)建。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdSMR突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。 lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素和LU霉素抗性。High5TM系列XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。

操作說明:

1.XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。 

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少14h。

注意事項(xiàng):

1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。 

2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。



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