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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞

簡要描述:Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞 XL1-Blue Chemically Competent Cell 保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號:XL1-Blue
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時間:2024-03-20
  • 訪  問  量:227

詳細介紹

品牌Abnbio貨號ABG008-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細胞培養(yǎng)應用領域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

XL1-Blue Chemically Competent Cell

基因型:

recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1lac [F'proAB lacIqZ?M15: Tn10 (tetR)]

簡要說明:

XL1-Blue菌株能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacIqZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素抗性。High5TM系列XL1-Blue感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。

操作說明:

1.XL1-Blue感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項:

1. 感受態(tài)細胞最好在冰上融化。

2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。


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